| 1 | FlorentiaNuotoClub SSD | Di Nardo Valeria, Bani Teresa, Somigli Martina, Biagiotti Matilde | 04'06''52 | 623 |
| 2 | Azzurra Nuoto Prato | Brogi Samira, Santi Carlotta, Ghinassi Aurora, Santoni Vittoria | 04'08''02 | 612 |
| 3 | Nuoto Livorno Sport Management | Turchi Virginia, Rossi Claudia, Retti Andrea, Gallerini Elisa | 04'10''43 | 595 |
| 4 | Nuoto UISP 2003 - Cascina | Kowalska Klara, De Wet Beatrice, Coscetti Giulia, Gamba Paola | 04'11''21 | 589 |
| 5 | Esseci Nuoto SSD | Poggiolini Guia, Caputo Linda, Mucci Virginia, Sacconi Martina | 04'11''27 | 589 |
| 6 | Arezzo Nuoto | Fanetti Gaia, Pierli Michelle, Caratelli Matilde, Terzani Scala Alice | 04'11''68 | 586 |
| 7 | Circolo Nuoto Lucca ASD | Puccetti Alice, Vita Eleonora, Rossi Eleonora, Cinquini Francesca | 04'14''32 | 568 |
| 8 | Team Nuoto Toscana Empoli | Gabellieri Giulia, Iula Ester, Lupi Alice, Mencherini Alice | 04'15''14 | 562 |
| 9 | Tirrenica Nuoto ASD - Viareggio | Gabrielli Eleonora, Lazzarini Eleonora, Rossetti Rebecca, Tabarrani Martina | 04'15''39 | 561 |
| 10 | Co.GIS Nuoto Pistoia | Vagnozzi Marta, Gai Vittoria, Matassa Ginevra, Del Greco Matilde | 04'16''44 | 554 |
| 11 | Virtus Buonconvento ASD | Mataloni Veronica, Tamagnini Camilla, Ceccarelli Caterina, Trevisan Azzurra | 04'18''65 | 540 |
| 12 | Nuoto Valdinievole ASD | Flori Vittoria, Bertoncini Lara, Mei Sara, Agnelli Maria Sofia | 04'19''48 | 535 |
| | Canottieri Arno - Pisa | Bigongiali Alice, Fuschi Elena, Campinoti Giovanna | 04'19''48 | 535 |
| 14 | Dimensione Nuoto Pontedera | Gianfaldoni Giulia, Malloggi Rebecca, Becuzzi Ludovica, Biagini Teresa | 04'24''22 | 506 |
| 15 | H. Sport SSD - Firenze | Romolini Sofia, Labardi Gaia, Lippi Eleonora, Casini Matilde | 04'26''91 | 491 |
| 16 | Futura Club I Cavalieri Prato | Fissi Ginevra, Branda Virginia Evelina, De Troia Giorgia, De Troia Greta | 04'27''02 | 490 |
| 17 | Nuotatori Pistoiesi | Frati Serena, Agostini Aurora, Vannacci Maria Sole, Fedi Marianna | 04'28''72 | 481 |
| 18 | Chimera Nuoto | Borgogni Miryam, Franci Greta Beatrice, Bichi Arianna, Frosini Nadia | 04'30''02 | 474 |
| 19 | Team Acqua Sport SSD - Livorno | Orlandini Giulia, Sarti Emy, Giovannetti Anna, Risaliti Elena | 04'31''65 | 466 |
