| 1 | Larus Nuoto ASD - Roma | Benghabrid Mahdi Abderraouf, Orsini Antonio Maria, Pelo Elisa, Pergoli Lucrezia Maria | 01'43''64 | |
| 2 | Libertas Rari Nantes Perugia | Fortini Alessandro, Carta Luca, Gobbi Alessia, Panza Alessandra | 01'43''76 | |
| 3 | Rinascita Team Romagna | Picci Giacomo, Biscaglia Marco, Mazzotti Viola, Foiera Elena Sofia | 01'45''38 | |
| 4 | Spoleto Nuoto | Di Giovanni Lorenzo, Pantanetti Alisia, Morelli Francesca, Andolfi Gianluca | 01'45''42 | |
| 5 | Atlantide SSD - Ciampino | Cugliari Matteo, Fortuna Chiara, Bizzarri Simone, Gentile Francesca | 01'45''66 | |
| 6 | Circolo Canottieri Aniene | Pensato Claudio Pio, Fe' Matilde, Quaglietti Daniele, Giovannetti Sara | 01'48''94 | |
| 7 | Accademia PDS Terni | Calderini Mattia, Martini Sofia, Ercolini Cristina, Materazzini Michael | 01'50''23 | |
| 8 | Thebris Perugia | Tacconi Francesco, Martini Alessandro, Minelli Simona, Tacconi Gaia | 01'50''26 | |
| 9 | Aria Sport SSD | Fini Alessandro, Corradini Lorenzo, Loriga Beatrice, Pandolfi Gaia | 01'50''36 | |
| 10 | Thebris Perugia | Mattioli Manuel, Capanni Giacomo, Ciaccio Rosa, Cerbini Elettra | 01'50''98 | |
| 11 | Circolo Canottieri Aniene | Onori Braian, Sileoni Sofia, Nazio Mirko, Di Bartolomeo Elisa | 01'51''68 | |
| 12 | Sport Shuttle 3.0 SSD | Donati Matteo, Stefanini Virginia, Renzi Sabrina, Tantucci Mattia | 01'52''00 | |
| 13 | Atlantide SSD - Ciampino | Di Vincenzo Luca, Peselli Carolina, Vallocchia Melissa, Amadei Lorenzo | 01'52''45 | |
| 14 | Libertas Rari Nantes Perugia | Nardella Alessia, Fei Riccardo, Chaby Chiara Hind, Carapellucci Manuel | 01'52''47 | |
| 15 | Spoleto Nuoto | Persichetti Paolo, Valentini Silvia, Cagnoni Lavinia, Pizzoni Martin | 01'52''53 | |
| 16 | Rinascita Team Romagna | Foschi Alice, Guidi Alan, Lugaresi Mattia, Amaducci Olivia | 01'52''64 | |
| 17 | Larus Nuoto ASD - Roma | Francione Carlo Alfredo, Anselmi Francesca, Assenso Luigi Giacomo, Agostini Alessia | 01'53''56 | |
| 18 | Swimming Club Quattroventi ASD | Sabatino Luca Vincenzo, Borriello Alfredo, Naviglio Sabrina, Alfieri Josephine | 02'03''51 | |
| 19 | Atlantide SSD - Ciampino | Berardi Andrea, D'Arcangelo Sofia, Cardajoli Flavio, Contestabile Vittoria | 02'04''25 | |
| 20 | Accademia PDS Terni | Claudiani Benedetta, Terenziani Maija, Calderini Flavio, Ciafre' Lorenzo | 02'04''66 | |
| 21 | Octopus SSD - Roma | Rossi Valerio, Muca Aurora, Granata Arianna, Munno Alessandro | 02'07''16 | |
| 22 | Swimming Club Quattroventi ASD | Bossa Luigi, De Gaetano Daniele, Montella Anna, Fascia Maria | 02'07''59 | |
| 23 | Aria Sport SSD | Dominici Marco, Pietrollini Sofia, Pascucci Matilda, Pandolfi Saverio | 02'10''38 | |
| 24 | Swimming Club Quattroventi ASD | Vastola Ciro, Nardaggio Gaetano, Mazza Flavia, Vivace Manuela | 02'16''51 | |
| 25 | Sport Shuttle 3.0 SSD | Montiroli Nicola, Colamedici Lucrezia, Colangeli Davide, Proietti Arianna | 02'17''29 | |
| 26 | Thebris Perugia | Guerrieri Angelo, Mencarelli Lorenzo, Renzi Vanessa, Santocchia Giada | 02'21''13 | |
| 27 | Accademia Del Nuoto Marino | Corsi Eleonora, Casu Michele, Marrocco Giulia, Calafiore Lorenzo | 02'22''72 | |
| | Accademia PDS Terni | Leonfanti Luca Matvei, Cesaroni Sara, Marsili Michele, Scatteia Korin | Squalificato | |
