| 1 | Team Nuoto Toscana Empoli | Lupi Alice, Mencherini Alice, Iula Ester, Gabellieri Giulia | 04'39''58 | 571 |
| 2 | FlorentiaNuotoClub SSD | Ialeggio Alice, Biagiotti Matilde, Rimediotti Francesca, Di Nardo Valeria | 04'42''42 | 554 |
| 3 | Arezzo Nuoto | Caratelli Matilde, Camarri Caterina, Pierli Michelle, Fanetti Gaia | 04'43''51 | 548 |
| 4 | Circolo Nuoto Lucca ASD | Rossi Eleonora, Casali Ginevra, Vita Eleonora, Puccetti Alice | 04'43''82 | 546 |
| 5 | Esseci Nuoto SSD | Condemi Anastasia, Caputo Linda, Caprai Giulia, Gemignani Alice | 04'46''54 | 531 |
| 6 | Nuoto UISP 2003 - Cascina | Stefani Laura, Coscetti Giulia, Kowalska Klara, Gamba Paola | 04'50''47 | 509 |
| 7 | Nuoto Valdinievole ASD | Bertoncini Lara, Bruni Giulia, Cardelli Chiara, Flori Vittoria | 04'52''59 | 498 |
| 8 | Nuoto Livorno Sport Management | Contadin Emma, Valesini Rachele, Retti Andrea, Gallerini Elisa | 04'54''81 | 487 |
| 9 | Azzurra Nuoto Prato | Santoni Vittoria, Randellini Emma, Gianassi Martina, Brogi Samira | 04'55''91 | 482 |
| 10 | Tirrenica Nuoto ASD - Viareggio | Tabarrani Martina, Rossetti Rebecca, Mariani Irene, Lazzarini Eleonora | 04'58''95 | 467 |
| 11 | Canottieri Arno - Pisa | Giannessi Martina, Campinoti Giovanna, Bigongiali Alice, Parenti Francesca | 05'00''63 | 459 |
| 12 | Co.GIS Nuoto Pistoia | Matassa Ginevra, Artoni Matilde, Del Greco Matilde, Gori Emma | 05'07''14 | 431 |
| 13 | Futura Club I Cavalieri Prato | De Troia Greta, Ingrosso Marianna Andrea, Branda Virginia Evelina, De Troia Giorgia | 05'08''21 | 426 |
| 14 | Virtus Buonconvento ASD | Ristori Aurora, Casprini Giulia, Trabalzini Gaia, Trevisan Azzurra | 05'28''79 | 351 |
