| 1 | Time Limit ASD | Pitocchi Eugenia, Natale Giuseppe, Pak Gerda, Maffei Martina | 04'08''50 | |
| 2 | Sicilia Nuoto SSD | Santangelo Eleonora, Asero Giuseppe, Guglielmino Sofia, Santangelo Alfio | 04'11''30 | |
| 3 | Polisportiva Mimmo Ferrito SSD | Marchese Arima, Iovino Andrea, Calo' Chiara, Seidita Marco | 04'14''48 | |
| 4 | CUS Salerno | Di Donato Riccardo, Pellegrino Chiara, Paciello Christian, Senatore Francesca | 04'18''84 | |
| 5 | Cosenza Nuoto | Martello Alessandra, Pellegrino Francesco Pio, Carnevale Letizia, Nuzzolo Luca | 04'19''24 | |
| 6 | Polisportiva Nadir - Palermo | Giambalvo Francesca, Grimaldi Davide, Parrinello Alessio, Guerrisi Simona | 04'20''48 | |
| 7 | Kroton Nuoto | Iuticone Dalila, Buzzurro Daniele, Filippelli Giulia, Rajani Giacomo Giorgio | 04'22''51 | |
| 8 | Pianeta Sport ASD - Reggio Calabria | Garufi Alessia, Artuso Cristian, Costarella Angelo, Cutrupi Valeria | 04'22''69 | |
| 9 | Gruppo Sportivo Fiamme Oro | Ponticelli Ludovica, Vaiola Mattia, Borgo Gabriele, Bonanno Benedetta | 04'26''35 | |
| 10 | Poseidon Sporting Club SSD - Catania | Bosco Gabriele Roberto, Messina Noemi Maria, Bruno Rachele Agata, Bosco Daniele Francesco | 04'26''49 | |
| 11 | Sprinteam SSD - Catania | Giustolisi Monica, Micali Walter, Pappalardo Annarita, Musumeci Giovanbattista | 04'27''72 | |
| 12 | Blu Team Nuoto ASD | Varamo Christian, Pansera Noemi, Pensabene Sara, D'Errigo Luca | 04'37''67 | |
| 13 | Nuotatori Krotonesi ASD | Fonte Ilaria, Maiorano Giada, Salerno Raffaele, Labonia Mattia Carmine | 04'39''24 | |
| 14 | Polisportiva Libertas Invicta - Potenza | Vaccaro Simona, Mangiamele Flavio, Onorati Vito, Caivano Benedetta Pia | 04'43''99 | |
| 15 | Rari Nantes Lamezia Terme | Torchia Luigi, Torchia Matteo, Renda Giulia, Giampa' Lucia | 04'44''44 | |
| 16 | Altair Nuoto SSD - Catania | Pesce Lorenzo Maria, Anfuso Giuseppe, Gasparini Marzia Miriam, Pappalardo Erika | 04'46''17 | |
| 17 | Mediterraneo Sport SSD - Taranto | Cazzaro' Andrea, Schiavone Luisiana, Correia Cardoso Melanie, Corona Alessandro | 04'48''49 | |
| 18 | Polisportiva Waterpolo Palermo | De Vita Mattia, Di Fiore Simona, Di Betta Ambra, Cusimano Manfredi | 04'50''97 | |
| 19 | US Acli Arvalia Nuoto Lamezia ASD | Ottaviano Gaia Anna Silvana, Rotondaro Emanuela, Nicotera Simone, Giampa' Domenico | 04'52''55 | |
| 20 | Acqua Azzurra - Ragusa | Assenza Simone, Corallo Mattia, Massa Chiara, Salvo Ilaria | 04'57''11 | |
| 21 | Hipponion Nuoto ASD - Vibo Valentia | Andreacchio Domenico, Greco Martina, Procopio Mattia, Moscato Claudia | 05'11''82 | |
